📋 实验流程
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树脂与第一个氨基酸
1 h选择合适的固相树脂并预载第一个氨基酸或连接接头
💡 技巧 树脂载量与种类决定产物
⚠️ 注意 充分溶胀树脂
🧪 这一步需要的耗材（点「去选购」到产品页选规格/品牌）
2
脱保护与偶联循环
数小时反复进行Fmoc脱保护和活化氨基酸偶联，从C端向N端延长
💡 技巧 偶联试剂的当量与时间
⚠️ 注意 监控偶联完全防缺失序列
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3
裂解与去除保护基
2–4 h用裂解混合液将多肽从树脂裂解并去除侧链保护基
💡 技巧 用适当清除剂抑制副反应
⚠️ 注意 裂解液需新鲜配置
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4
纯化与质检
数小时用反相HPLC纯化多肽，质谱和纯度分析验证
💡 技巧 纯度满足下游应用要求
⚠️ 注意 冻干后密封防潮
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误（避坑指南）
- ① 偶联不完全致缺失序列
- ② 树脂溶胀不足致反应不均
- ③ 副反应(消旋/聚集)产量低
- ④ 裂解副产物污染
- ⑤ 过长或难溶肽难合成
❓ 常见问题（做坏了怎么办）
+合成的多肽一般多长？
常规固相合成约10-50个氨基酸，更长需更复杂策略。
+如何提高多肽纯度？
优化偶联与裂解、监控反应、用反相HPLC纯化并复检测。
+合成后如何确认结构？
用质谱确认分子量并与理论值比对，必要时做测序或氨基酸分析。