📋 实验流程
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细胞与电极准备
30 min准备贴壁或急性分离细胞,拉制并灌注内液的玻璃电极
💡 技巧 电极尖端合适阻值关键
⚠️ 注意 电极避免气泡进入
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2
形成封接
30 min显微镜下推进电极贴近细胞,施加负压形成高阻吉欧封接
💡 技巧 电极正压避免堵塞
⚠️ 注意 轻柔推进防损细胞
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3
破膜或构型
10 min通过负压或脉冲破膜进入全细胞,或切成外翻/外细胞等模式
💡 技巧 选择模式依研究问题而定
⚠️ 注意 破膜过度或电流过大损伤
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4
记录与分析
1–3 h施加电压或电流方案记录离子流/电位,软件分析电流幅度、通道动力学
💡 技巧 串联电阻补偿提高精度
⚠️ 注意 漂移和液接电位的校正
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)
- ① 封接失败或电阻不足
- ② 电极堵塞或尖端堵塞
- ③ 串联电阻过高致记录失真
- ④ 液接电位未校正致偏移
- ⑤ 机械振动或电磁干扰致噪声
❓ 常见问题(做坏了怎么办)
+全细胞和单通道记录有何区别?
全细胞记录整个细胞电流,单通道(切膜)记录单个通道活动。
+如何降低记录噪声?
用法拉第笼避电磁、气浮台减震、优化电极与地线。
+为什么要补偿串联电阻?
串联电阻引起电压误差和电流失真,补偿可提高记录准确性。