📋 实验流程
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培养基准备
1 h配制琼脂或液体培养基,高压灭菌后倾注平皿或分装
💡 技巧 不同菌种选不同培养基
⚠️ 注意 灭菌彻底防污染
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2
接种培养
1–2 天用接种环挑取菌落接种,在适宜温度(如37℃)和氧气条件下培养
💡 技巧 厌氧菌需厌氧罐/手套箱
⚠️ 注意 无菌操作防交叉污染
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3
4
保种
30 min加甘油制备冻存液,-80℃保存长期保种
💡 技巧 甘油终浓度约15-25%
⚠️ 注意 标记菌种与日期
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)
- ① 培养基成分或pH不适合目标菌
- ② 无菌操作不当致污染
- ③ 厌氧菌暴露氧气致生长失败
- ④ 培养温度或时间不当
- ⑤ 保种标签缺失致菌株混淆
❓ 常见问题(做坏了怎么办)
+如何确认为纯培养?
划线后出现单一均一形态的菌落,并用革兰染色或16S验证。
+为什么要提供适宜氧气条件?
需氧、兼性、厌氧菌对氧敏感度不同,需氧供方式不同。
+如何长期保种?
甘油-80℃或冻干保存,避免反复传代导致突变。