📋 实验流程
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菌液准备
30 min从纯培养挑菌落，调整至Mcfarland标准浓度(约含1.5×10^8 CFU/mL)再稀释
💡 技巧 标准菌液浓度影响结果
⚠️ 注意 使用新鲜对数期培养
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2
药物梯度配制
30 min直接在96孔板中倍比稀释抗菌药物成系列浓度
💡 技巧 浓度范围覆盖预期MIC
⚠️ 注意 操作规范一致保证重现性
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3
接种与孵育
16–24 h加入稀释菌液至终浓度约5×10^5 CFU/mL，适宜温度孵育
💡 技巧 设阳性(无药)与阴性对照
⚠️ 注意 设无药生长对照验证菌活力
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4
判读MIC
15 min肉眼观察孔内浊度，确定抑制可见生长的最低药物浓度
💡 技巧 按CLSI标准判读
⚠️ 注意 污染或微小生长影响判读
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误（避坑指南）
- ① 菌液浓度不标准致MIC偏差
- ② 药物稀释误差累积影响结果
- ③ 培养基或孵育条件不符CLSI
- ④ 无生长对照无法判读
- ⑤ 污染致假耐药或假敏感
❓ 常见问题（做坏了怎么办）
+MIC和MBC有何区别？
MIC为抑制生长的最低浓度，MBC为杀灭99.9%细菌的最低浓度。
+如何判耐药或敏感？
与CLSI断点比较MIC值，低于敏感折点判敏感，高于判耐药。
+为什么需做生长对照？
验证菌株活力有效，确保无药孔确实生长，结果才有意义。