📋 实验流程
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细胞与病毒准备
30 min培养细胞至适宜汇合度，解冻病毒并计算所需MOI
💡 技巧 MOI设定依载体类型与细胞
⚠️ 注意 病毒解冻后不宜反复冻融
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2
加入病毒转导
4–24 h按MOI将病毒加入培养基，可加助转染剂(polybrene)提高效率
💡 技巧 低MOI减少毒性
⚠️ 注意 病毒感染剂量须在安全柜操作
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3
换液与检测
1–2 天感染后换液除病毒，培养至表达目标时间，检测表达或感染效率
💡 技巧 GFP标记便于观察效率
⚠️ 注意 培养时间依载体表达动力学
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4
效价确认与后续
1 h评估转导/感染效率并选择合适MOI投入后续实验
💡 技巧 流式定量感染效率
⚠️ 注意 防病毒扩散与污染
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误（避坑指南）
- ① MOI过高致细胞毒性
- ② 病毒解冻后活力下降
- ③ 转染/感染效率低表达不足
- ④ 反复冻融致病毒批量失效
- ⑤ 感染模型剂量不标准结果偏差
❓ 常见问题（做坏了怎么办）
+什么是MOI？
感染复数——每个细胞所加入的病毒颗粒或感染单位数决定感染程度。
+如何提高转导效率？
加入polybrene、提高感染时间和病毒浓度，或用更高亲嗜性血清型。
+感染后多久检测表达？
依载体而异，如慢病毒24-72h、AAV需要更久等，需实测时间进程。