📋 实验流程
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检测体系建立
1 天建立生化或细胞检测,优化底物、酶/细胞量和孵育条件
💡 技巧 检测需窗口大且稳定
⚠️ 注意 测定Z因子评估可行
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
2
化合物板准备
1 h从库中转移化合物到检测微板,设置浓度与对照
💡 技巧 高水平/低水平对照校准
⚠️ 注意 DMSO浓度保持一致
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3
高通量运行
1–2 天自动化加样、孵育后检测读取整个板
💡 技巧 自动化减少批次差异
⚠️ 注意 保持板间一致性
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4
数据分析与命中
1 天标准化数据计算抑制率,用统计阈值筛选命中并重复验证
💡 技巧 命中率与假阳性控制
⚠️ 注意 需重复与剂量验证
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)
- ① 检测窗口小难以筛选
- ② Z因子差导致结果不可靠
- ③ 液体处理误差致板间差异
- ④ 假阳性高浪费验证资源
- ⑤ 未被重复确认的命中
❓ 常见问题(做坏了怎么办)
+什么是Z因子?
衡量检测窗口与变异的标准,>0.5认为适合筛选。
+如何控制假阳性?
重复实验、剂量-反应验证、用对照排除非特异性或物干扰。
+生化筛选与细胞筛选如何选择?
生化靶向明确通量高,细胞更贴近体况但受细胞毒性影响。