📋 实验流程
全流程一览,产品可直接加购1
流动相准备
20 min按比例混合超纯水与有机溶剂,超声脱气并过滤
💡 技巧 用不含气泡的脱气流动相避免基线噪声
⚠️ 注意 有机相比例需保持一致
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
2
标准品与样品配制
30 min用流动相溶解标准品和待测样品,配成适宜浓度并过滤
💡 技巧 配外标标准曲线做定量
⚠️ 注意 进样前样品需过滤除颗粒
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
3
色谱柱平衡
30 min以流动相冲洗色谱柱至基线稳定
💡 技巧 平衡时间以柱体积 10 倍以上为宜
⚠️ 注意 更换流动相需先排气
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
4
方法设置与进样
20 min设定流速、柱温、检测波长,进空白、标样和样品
💡 技巧 按梯度或等度模式运行
⚠️ 注意 避免超压损坏色谱柱
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
5
数据处理与定量
30 min对峰面积积分,用标准曲线计算样品浓度
💡 技巧 至少 5-6 点标准曲线
⚠️ 注意 检查保留时间漂移
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)
- ① 流动相未脱气导致基线毛刺
- ② 样品不过滤堵塞色谱柱
- ③ 标准曲线点数过少导致定量偏差
- ④ 柱压异常升高未及时处理
- ⑤ 检测波长选择不当灵敏度不足
❓ 常见问题(做坏了怎么办)
+为什么要用色谱级溶剂?
杂质少,避免鬼峰干扰定量。
+柱压升高怎么办?
先反冲或更换入口滤头,必要时更换色谱柱。
+选等度还是梯度?
组分少用等度,极性差异大用梯度更好分离。