📋 实验流程
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波长与仪器校准
20 min预热光源,用瑞利/拉曼信号和标准物校准波长和强度
💡 技巧 定期用荧光标准校准灵敏度
⚠️ 注意 避免环境光进入光路
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
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标准溶液配制
20 min配制系列浓度荧光标准测荧光强度
💡 技巧 低浓度线性好敏感性高
⚠️ 注意 浓度过高发生荧光淬灭
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
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样品与空白测定
20 min分别测空白和样品荧光强度并扣除空白
💡 技巧 环境温度影响荧光强度需稳定
⚠️ 注意 气泡会散射干扰测量
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
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定量与数据处理
20 min绘制标准曲线并计算样品浓度
💡 技巧 用相对荧光单位表示强度
⚠️ 注意 偏离线性应稀释复测
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)
- ① 浓度过高发生荧光淬灭
- ② 参比液污染使空白偏高
- ③ 温度波动导致强度漂移
- ④ 比色皿表面划伤散射
- ⑤ 光源衰减未校准影响重现性
❓ 常见问题(做坏了怎么办)
+荧光比紫外灵敏多少?
通常高 2–3 个数量级。
+不发光物质怎么测?
可用衍生化或标记荧光探针。
+为什么荧光强度忽高忽低?
多因温度、光源或比色皿污染。