📋 实验流程
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种子培养
1 天从甘油管/平板活化菌种，液体扩培至对数期作种子
💡 技巧 种子活力与纯度关键
⚠️ 注意 批次间保持一致
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2
反应器装载与灭菌
2 h配制发酵培养基装入反应器，原位灭菌并冷却至接种温度
💡 技巧 校准pH/溶氧电极
⚠️ 注意 灭菌彻底防杂菌污染
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3
接种与培养
1–3 天接入种子，控制温度、pH、溶氧和转速，实时监测补料
💡 技巧 补料策略优化产率
⚠️ 注意 溶氧过低抑制生长
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4
收获与分析
2 h收集菌体或发酵液，检测产物浓度、生物量与纯度
💡 技巧 取样频率依据工艺阶段
⚠️ 注意 按目标产品选择收获时机
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⚠️ 新手常犯的 5 个错误（避坑指南）
- ① 灭菌不彻底致杂菌污染酸败
- ② 溶氧或pH失控抑制生长
- ③ 补料策略不当产率低
- ④ 电极校准不准致控制偏差
- ⑤ 种子污染或老化致批次失败
❓ 常见问题（做坏了怎么办）
+发酵放大需注意什么？
保持溶氧、混合和搅拌强度一致，需小试中试逐步放大。
+如何防污染？
严格灭菌、密封、无菌操作并定期监测活菌数与洁净度。
+补料发酵和批式有何区别？
补料发酵持续供给营养避免底物抑制和副产物积累，得率更高但更复杂。