📋 实验流程
全流程一览，产品可直接加购1
细胞准备
30 min取对数期细胞消化收集，计数确保活力高且处于良好状态
💡 技巧 只冻存健康低代次细胞
⚠️ 注意 消化须温和防损伤
🧪 这一步需要的耗材（点「去选购」到产品页选规格/品牌）
2
配制冻存液
10 min用含DMSO的冻存液重悬细胞，DMSO终浓度5-10%
💡 技巧 预冷冻存液降低毒性
⚠️ 注意 DMSO室温接触细胞过久有害
🧪 这一步需要的耗材（点「去选购」到产品页选规格/品牌）
3
分装与降温
1 h分装至冻存管，放入程序降温盒或-80℃以约1℃/min降温，再转液氮
💡 技巧 梯度降温是关键防冰晶
⚠️ 注意 标记品系、代次、日期
🧪 这一步需要的耗材（点「去选购」到产品页选规格/品牌）
4
复苏
30 min快速37℃水浴解冻，转入预温培养基离心，移除DMSO后铺板
💡 技巧 快速解冻减少渗透损伤
⚠️ 注意 轻柔操作防细胞破损
🧪 这一步需要的耗材（点「去选购」到产品页选规格/品牌）
⚠️ 新手常犯的 5 个错误（避坑指南）
- ① 冻存细胞状态差导致复苏后大量死亡
- ② 降温过快形成冰晶损伤细胞
- ③ 复苏时DMSO未充分去除致毒性
- ④ 冻存液未预冷加重DMSO渗透损伤
- ⑤ 标签缺失导致品系混淆
❓ 常见问题（做坏了怎么办）
+复苏后多久可正常使用？
通常复苏后1-2代恢复正常，建议传代1次后再用于实验。
+如何检测冻存效果？
复苏24h后用台盼蓝或流式测活率，>80%为佳。
+可以冻存多少细胞？
常规1-2×10^6/管，克隆化或稀有细胞可增加。