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🧪 分离纯化 · 实验方法

柱层析

最常用色谱分离,把产物分出来
🎯 难度 ★★☆ 中等 总时长 约 2–4 小时 🎯 用途 对实验室合成粗产物进行柱色谱纯化,分离目标化合物与杂质。
📖 方法原理(一句话看懂)
不同成分对硅胶吸附强弱不同,用溶剂把它们一一冲下来。
下面是 4 个步骤,每步点开看怎么做 + 把要用的产品加进清单,做完一套清单自动配齐。

📋 实验流程

全流程一览,产品可直接加购
1

装柱与压实

30 min
干法或湿法装硅胶柱,敲实至无气泡。
💡 技巧 预先润湿压实,分离更均匀
⚠️ 注意 气泡会导致流速不均、拖尾
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
2

上样

15 min
粗产物溶于少量溶剂,沿壁缓慢加到柱顶沉积层。
💡 技巧 干拌硅胶上样更省溶剂
⚠️ 注意 上样量太大会过载,分离变差
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
3

梯度洗脱与收集

1–2 h
用极性递增的溶剂洗脱,分部收集于试管。
💡 技巧 TLC先定好洗脱梯度
⚠️ 注意 流量过大会压缩分离度
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)
4

合并与浓缩

30 min
TLC合并含单一产物的管,旋干得纯品。
💡 技巧 合并后称重,算回收率
⚠️ 注意 勿把含杂质的边缘管并入
🧪 这一步需要的耗材(点「去选购」到产品页选规格/品牌)

⚠️ 新手常犯的 5 个错误(避坑指南)

  • 硅胶装不平,流速边偏
  • 上样过载,拖尾分不开
  • 洗脱梯度太陡,杂质混在一起
  • 没有用TLC确认,把杂质并进产物
  • 溶剂未干上柱,分离宽度变差

❓ 常见问题(做坏了怎么办)

+怎么判断洗脱梯度?
先做TLC确定位移比,选Rf在0.2-0.3的混合溶剂。
+硅胶可以重复用吗?
一般不建议,吸附杂质会残留,除非严格活化。
+柱子堵了怎么办?
多为样品析出或气泡,可用加压或轻敲解决。

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数据真实性:产品品类来自玖梧供应链标准分类体系,方法→步骤→产品三级打通。 最后更新: 2026-08-23 · v3.0